[討論] 如何得知膜蛋白在何處被磷酸化修飾?
如題,最近想設計實驗探討膜蛋白是在胞內被磷酸化或是運送到細胞膜後才被磷酸化。
請問各位有人看過相關的文章嗎或做過相關的實驗嗎?
目前想到的方法是使用exocytosis inhibitors,再用磷酸化抗體做IF實驗觀察。 但總覺得使用抑制劑不太好
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.136.13.182
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1477496404.A.3C6.html
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這樣好像還是不能確認磷酸化的位置@@
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有試過了,染到的都在細胞膜上,想到的原因可能是磷酸化後會馬上被送到膜上。
※ 編輯: gustpigex (223.136.13.182), 10/26/2016 23:58:03
※ 編輯: gustpigex (223.136.13.182), 10/26/2016 23:59:51
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以前學長有做過接GFP,會影響蛋白的運輸,會不會上膜我要再問問他。說不定可以試試看
※ 編輯: gustpigex (61.228.33.252), 10/27/2016 00:29:59
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磷酸化位點在cysosol,蛋白質C-terminus的位置
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為6次穿膜的膜蛋白,N,C端皆位於cytosol
※ 編輯: gustpigex (223.140.138.61), 10/27/2016 13:33:05
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※ 編輯: gustpigex (223.140.138.61), 10/27/2016 13:35:47
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