[求救] 冷凍切片在sucrose步驟發生的問題
各位前輩好,
最近在做spinalcord的冷凍包埋
使用4%PFA perfusion
取下spine後 再用4%PFA固定一晚
再用PBS wash 浸泡一晚
接著10%-20%-30% sucrose 各脫水一晚
然後遇到一個問題是,
在當我換到sucrose後,我的組織不會沉下去
我看protocol 都說要沉底部後再換下一個濃度繼續脫水
請問一下,這問題可能是在哪裡?
是我的組織沒有取好嗎? 還是有氣泡在裡面之類的?
麻煩有經驗的前輩指點我一下><
千萬個感謝
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