[求救] glycerol stock不能用
想請問，我之前Constuct plasmid的菌液，加入15% glycerol後冰-80
最近想重抽plasmid，就取了50 ul加進3 ml的LB(Amp) broth裡去增菌然後抽mini
o/n後菌看起來很多，但抽起來很少...2 ml抽到30 ng/ul而已
我有確認不是我抽mini的問題，因為不同的菌液有的glycerol stock就抽很好 = =
我想想會不會是我當初保存菌液太不謹慎了...沒有切完RE就趕快凍起來
好像拖了個兩三天...
我嘗試劃菌後挑single colony
但菌長得很少，看起來也沒很健康
我目前還想得到的方式就是拿之前的plasmid重新transformation
只是因為比較麻煩點，又會浪費competent cell (雖然自製的算便宜...)
不曉得版上大大還有沒有其他的建議
謝謝！
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