[求救] IHC. 陽性呈色淡

看板Biotech (生命科學)作者 (1232131213)時間8年前 (2016/12/03 15:44), 編輯推噓4(404)
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最近做IHC. 用vector DAB去呈色,陽性有出來但是很淡的說 一抗目前是1:100 二抗是1:200 其實一二抗都有是著調過更濃的比例 還是一樣 其實之前有做過幾次陽性深的,但是是偶爾出現 藥劑也換新的了 一直都很淡,DAB放到10分鐘,也是而且背景很紅 之前很深陽性是一放下去馬上就變紅中棕色了 請問各位指點一下ORZ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 39.8.192.77 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1480751074.A.776.html

12/03 16:11, , 1F
DAB是新鮮現泡的嗎?
12/03 16:11, 1F

12/03 16:26, , 2F
對啊 先泡的
12/03 16:26, 2F

12/03 17:51, , 3F
Buffer pH值多少?
12/03 17:51, 3F

12/03 17:52, , 4F
可以試試0.015M Tris buffer, pH7.4
12/03 17:52, 4F

12/03 20:22, , 5F
不會是一抗 or 二抗的問題嗎?
12/03 20:22, 5F

12/03 20:23, , 6F
二抗 為何是有比例?不是IHC 專用二抗嗎?
12/03 20:23, 6F

12/03 21:32, , 7F
我想原po需要把整個染色步驟po出來,我們才有辦法幫你
12/03 21:32, 7F

12/09 16:10, , 8F
修改一下上面推文:0.15M Tris buffer, pH7.4才對
12/09 16:10, 8F
文章代碼(AID): #1OGdVYTs (Biotech)
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