[求救] WesternBlot的Band結果判讀?!

看板Biotech (生命科學)作者geltukou (一生一世)時間8年前 (2016/12/21 10:42)推噓2(2推 0噓 7→)

留言9則, 5人參與討論串1/1

想請問版友們是否有碰過這樣的情況? 目前實驗室做Western Blot結果，常碰到這樣的問題操作上大致沒有問題，1%BSA配製抗體，稀釋倍數依說明書上的指示說明書上也會標出表現出的band會在多少kDa的位置但是做出的結果，最明顯的band表現，卻與說明書標示的位置不符，常常會偏高說明書上顯示為14kDa，此抗體為monoclonal antibody http://imgur.com/kurneKz

但做出來最明顯的band卻在20kDa左右，原定的14kDa反而不清楚或根本沒有band http://imgur.com/FV4o4fy

之前思考或許是各家marker的標示位置不同，換過兩三家不同的marker仍有相同的狀況並非只有發生在此抗體，已經做過好幾個一抗均是如此的結果... 而且也不是只有一家廠商，大部分都是monoclonal antibody....(囧))) 請遇到相關經驗的版友能給我們一點意見，是因為它是monoclonal antibody，基本上就相信它顯示最明顯的band 或是有其他方式可以確認呢? 謝謝大家。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.107.71.57 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1482288154.A.349.html

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lail

12/21 12:23, , 1^F

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lail

12/21 12:23, , 2^F

12/21 12:23, 2^F

我們目前也覺得不能相信差太多的明顯band~但是做幾次都是這樣~TAT 請問常用的positive control是指哪個呢? ※ 編輯: geltukou (120.107.71.57), 12/21/2016 13:02:59