[求救] bacillus subtilis菌量爆增

看板Biotech (生命科學)作者 (幫幫)時間8年前 (2017/04/28 23:48), 編輯推噓6(6015)
留言21則, 9人參與, 最新討論串1/1
想請問一下版上 就是我用bacillus subtilis來表現蛋白 一直以來我都是從凍管劃平板 然後在從平板上刮菌直接液態培養 然後再取胞外液跑SDS PAGE看表現量 之前培養完後的OD值大約只有2~3左右 可是最近不管怎麼養OD都很飆到5~6或是更高 然而我發現OD值越高我的表現量不是很少不然就是幾乎看不到 想問是不是bacillus subtilis在凍管放久是不是容易變異,還是因為我常常凍管拿進拿 出導致我的bacillus subtilis變不穩定 附上試過的培養條件 30度 150rpm 12hr 24hr 各測一次OD 都已經到5 37度 200rpm 12hr 24hr 如上 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.83.20.2 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1493394536.A.C33.html

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有汙染吧
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我也覺得是污染XD
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其實我也有想過汙染的可能,只是我都有放抗生素。
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可是我覺得學長教配抗生素的方法有點奇怪。
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我是取0.001g的Erythromycin+1mL ddH2O,但是我發現Ery
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thromycin不太溶於水,所以學長就叫我把多餘的抗生素
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用小飛碟過濾即可,這樣濃度不就跑掉了!!??想問一下
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還是我有什麼辦法可以溶Erythromycin???
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stock要配在酒精裡
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學長要打屁股XD
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想問一下 要如何用酒精配製??是要用幾%的??我看網路上
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有人說用適當純酒精溶後,再用水定量??這樣對嗎?謝謝
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大大
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用酒精配到飽和濃度就行了吧
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google sigma erythromycin
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04/30 18:11, , 16F
污染吧…
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05/02 12:05, , 17F
污染了...
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05/03 15:40, , 18F
怎麼看都像是汙染
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05/31 16:21, , 19F
可以鏡檢一下,通常都是球菌或大腸桿菌汙染較多
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05/31 16:21, , 20F
跟桿菌會有明顯差異
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04/23 13:21, , 21F
污染90%,Ery使用濃度很低,再找一個抗生素一起再篩選
04/23 13:21, 21F
文章代碼(AID): #1P0sHemp (Biotech)
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