[求救] coomassie blue band 反白

看板Biotech (生命科學)作者 (wewennn)時間8年前 (2017/05/03 10:00), 編輯推噓2(207)
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不好意思想請問一下各位前輩 我跑了8%的SDS膠(沒有加gelatin) (protein的量是50ug/20ul) 因為不太確定protein位置 所以想染coomassie blue看看 (reused 一次的染劑 室溫搖晃染30分鐘 用ddH2O 室溫搖晃退染一天) 結果染出來的band不是藍色 而是呈現和染gelatin 時一樣的反白狀 因為是第一次出現這種狀況 爬文也只有看到有人問過Western 的band反白 估狗也沒有找到答案 想請問一下有人知道為何會呈現反白嗎? 或有人也有類似經驗嗎?該如何解決呢? 謝謝 http://i.imgur.com/oMSxSNG.jpg
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05/03 13:07, , 1F
我記得退染是用50%MeOH+10%HOAc吧?
05/03 13:07, 1F

05/03 15:41, , 2F
因為之前也是用水退 不過是第一次這樣
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謝謝建議我下次試試!!
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05/03 16:28, , 4F
我也記得是醋酸 不過這跟你的染劑配方也有關係 請goog
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le自己的染劑配方
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有些公司會賣G250配好的整瓶,就有建議用水退染即可
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確實是有那種商品 simply blue 是用水退染即可
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05/03 21:20, , 8F
我有疑似是simply blue的recipe 裡面是etoh跟g250 不
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05/03 21:20, , 9F
過simply blue不會把背景染成那樣
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文章代碼(AID): #1P2JcmYo (Biotech)
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