[求救] 請問collagen的western用UREA會比較好嗎?
我用一般的RIPA跑collagen,雖然也能跑,但效果不好,要loading很多,RIPA廠商給的配方如下。
0.5M Tris-HCl, pH 7.4, 1.5M NaCl, 2.5% deoxycholic acid, 10% NP-40, 10mM EDTA
後來我用UREA,GAPDH差不多,但UREA的collagen明顯多很多,但是用UREA問題是離心後很容易有鼻涕,
BCA定量也要注意干擾。加上我也要跑其他蛋白,有些protocol有提到用酸溶的不曉得會不會影響其他
蛋白。
請問一般如果同時要跑collagen和其他蛋白的western,有特別建議用UREA或甚麼成分的lysis buffer嗎?
如果真的要用UREA,那個鼻涕是染色體嗎 ?要如何去除那個黏黏的鼻涕狀沉澱?
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當你選了一間新餐廳,發現沒想像中的好吃的時候,你下次願意去吃另一間食安有問題的,
當作給新餐廳老闆的一點抗議嗎?
當你發現新買的飲料不好喝,你下次願意去喝化糞池的水,當作表示對飲料商的不滿嗎?
當你宿舍舍友管機歪又囉嗦,你願意搬去和強暴犯住一起,表達對原本舍友的不滿嗎?
當你發現小孩還不會講話,只會哭很煩,你會選擇把這個小孩丟到孤兒院,再生一個看會不會安靜點嗎?
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