[討論] westernblot running gel band 歪斜

看板Biotech (生命科學)作者 (Anti de Sitter)時間8年前 (2017/08/22 06:05), 編輯推噓4(4016)
留言20則, 8人參與, 最新討論串1/1
如題,爬文找資料以後, 覺得還是不清楚問題出在哪裡。 最近 band 在靠近 gel 兩側的地方常常往上翹約30-45度。以下是我的條件,還請板上同 仁請教: Running buffer: 沒用過,三週前泡的。 Voltage: 不管是 60 80 110 跑完全程都一樣(110有先用低電壓跑過線)會歪斜。 Gel: Bio-Rad commercialized protein gel. 都是用新買不到一周。 Sample: 體積固定為 10 或 20 ul, marker 分別為 7 或 14 ul. (之前跑10, 20 或 40 ,marker分別為 7 或14,都沒有問題。最近想說歪掉了才調整成10ul,但還是有問題 ) 有額外發現到的是最近金屬線冒泡比以前多一些,以前80 volt看不太到冒泡,最近80就 像以前120一樣冒很多。 不知道以上環節是否哪裡最有可能導致 band 歪掉? 還是有其他原因? 謝謝大家! -------------------------------------------------------- 簽名檔 你和那些反年改團體 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 147.140.233.30 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1503353109.A.4D2.html

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就不要跑最邊邊兩個lane啊
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正常 tank電極設計問題
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你用什麼壓膠?
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precast gel還浪費lane很不值得
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可以試試全程放冰箱+80V左右去跑
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自製的高趴數膠這樣跑都很直很漂亮
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老實講只是要收data的我才不管勒 要發paper的就浪費幾
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個lane也無妨XD
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啊我笨了,沒注意到是precast gel。跑的時候每個lane都有
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東西嗎?我建議是兩邊的lane不要下sample,但要加loading
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dye讓電場穩定,個人最近才跑過過期三年的precast gel電
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壓200V都還OK。如果這樣還是有問題,可以找廠商確認,因
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為precast gel...品質不一定一樣,可能你那批貨有問題。
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最常見就是銅線老化嘛 你看銅線最兩端是不是有金屬堆
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積 泡泡醋也許會好一點
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改成40V 慢慢跑超級直
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電泳槽那個是白金絲不是銅線
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可是Biorad的precast gel不是建議要用200多V跑嗎?你這
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樣電壓太低了吧
09/08 20:03, 20F
文章代碼(AID): #1PcraLJI (Biotech)
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