[求救] patch clamp問題請教

看板Biotech (生命科學)作者bridge850108 (bridgez)時間7年前 (2017/12/23 18:48)推噓1(1推 0噓 5→)

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版上各位先進好，一樣是先前在版上詢問的專討論文內容還有疑問， google了也無法理解因此想請教各位。測量植物離子通道實驗時使用patch clamp技術例如從-145mV~+35mV 增加電壓區間為+30mV，60秒測一次我想問： 1、控制電壓去測量電流的目的是什麼？觀測到的資料可以對離子通道做什麼推測？我猜測是利用像V=IR去計算通道電阻來推斷通道開闔狀態，不知道是否正確。 2、請問為什麼要從-145~+35mV做多次不同電壓測量？不同電壓的目的是什麼呢？ 3、還有想問為什麼測量鉀離子通道時多從-216mV左右開始測到+60mV左右結束，而測陰離子通道時多從-145mV開始+35mV結束呢？請問這電壓的差距有生理上的意義嗎？ 4、實驗時bath solution含有30mM CsCl，而pipette solution含有150mM CsCl(其他還有 MgCl2、CaCl2、MES、EGTA、HEPES)，請問實驗是利用氯化物濃度差來造成跨膜電位差以及在離子流出時維持電壓在在holding potential的嗎 5、作者說了'whole-cell slow-type anion currents'這個說法，我以為whole-cell是紀錄整個細胞的狀態，請問為什麼還能針對單一S-type anion channel檢測電流呢? 6、別篇文獻提到了'Currents were identified as slow anion currents by their kinetics and reversal potential'，可是這句話的出處文獻沒有發表，教授也問了作者是如何辨認其為S-type而非R-type anion channel? https://imgur.com/q1TTUbC

所以我也隨便(跪)找了一張圖，a~d為S-type，e、f為R-type，想請先進們簡略解釋兩種 channel在圖表上的差異。文獻 https://goo.gl/RY5rqQ 小弟資質駑鈍應該有非常多地方理解錯誤，煩請各位解惑，非常感謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 218.166.179.122 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1514026103.A.0B2.html