RNAlater造成genomic DNA 260/230值過低
大家好
最近在收新鮮腫瘤組織抽genomic DNA,之後預計做bisulfite conversion和NGS
我是將組織常溫保存於RNAlater (Thermo fisher)
並在4小時內就進行DNA抽取
選用的kit為Genedirex DNA isolation kit (tissue)
在RNAlater到貨前,組織是用snap freezing的方式保存
按照kit的protocol做,260/280及260/230皆在理想範圍內
但昨天開始用RNAlater保存組織後,將組織從RNAlater夾出後進行相同DNA extraction步
驟
但做出來的260/230只有1.2左右
我懷疑是RNAlater造成,在處理過程中,原本澄清的上清都變得很混濁......column的膜上
還有大量白色結晶(如圖)
找過資料與官網建議,組織從RNAlater取出後,用kimwipe盡量吸乾多餘RNAlater
我今天照這方法試過
260/230為1.6
過程中的上清仍混濁,column中一樣有白色結晶(但比昨天少了些)
實在是很苦惱
想請教該如何解決RNAlater造成的260/230過低的問題,
謝謝大家!
https://i.imgur.com/GZoohn1.jpg

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.72.102.155
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1515860995.A.76C.html
推
01/14 03:30,
7年前
, 1F
01/14 03:30, 1F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
14
48