[討論] 定序後發現許多變異鹼基

看板Biotech (生命科學)作者 (色狼)時間7年前 (2018/01/17 23:36), 編輯推噓1(102)
留言3則, 1人參與, 7年前最新討論串1/1
我將病毒的PCR產物送定序後,第一次定序的結果生技公司回報為 [有雜訊] 打開定序的訊號圖後,果然在幾個地方都有一些雜訊 讓人不是很確定那個位置應該要是哪一種鹼基 於是再次增幅並切膠後再送一次定序 雖然生技公司不再回報有雜訊 但是仔細檢查在相同的位置仍然出現了幾乎同樣的曖昧訊號 因此我懷疑這恐怕不是雜訊 而是我所夾取的位置在該樣本中就是有一些變異存在 也許是有不同變異型的病毒感染同一個體 我的問題是 我的研究是要嘗試以這個基因位置為標的來繪製這類病毒的演化樹 使用的軟體是MEGA及BioEdit 目前猜測BioEdit進行序列比對時應該可以接受變動鹼基 但我不知道對MEGA繪製演化樹會否造成問題呢? 先感謝各位大大 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.141.55.29 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1516203406.A.126.html

01/18 12:48, 7年前 , 1F
用PCR定序不準就做個cloning拿去定序吧
01/18 12:48, 1F

01/18 12:49, 7年前 , 2F
多定個3,4條看看可以確認你那些snp有幾種型
01/18 12:49, 2F

01/18 12:51, 7年前 , 3F
再拿這幾條做alignmen後用Mega畫樹,不會有什麼問題
01/18 12:51, 3F
文章代碼(AID): #1QNssE4c (Biotech)
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