[求救] siRNA transfection
手機輸入排版請見諒
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我的實驗:
想把Target protein siRNA 送入 Jurkat T Cell中, 看這個 gene KD 後的影響
大部分paper都是用 電轉染的方式
但一次電就得用掉 2nmol siRNA
(Dharmacon 是5nmol 22000NT……)
有點太過噴錢
而我在網頁上有看到一些廠商
Viromer blue/Genmute說明可以 transfect siRNA 到Jurkat中，
而且都號稱有高效率
想請問是否有使用過的前輩能提供資訊呢?
或是電轉染根本不用那麼多 siRNA ?
謝謝
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其實同時有用三條 shRNA (已包成病毒)去分別感染
但篩藥一週後看起來是沒有KD效果…
(我用 wb 去看) 所以才會想改用 sirna
而且我已經花一個月在等這三個 shRNA了，沒那麼多時間等下一個…
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我自己沒有拿其他細胞試過，會在用293試試看
別人的 paper用同樣的 shRNA ,在 Hela 跟 primary fibroblast大概都有90% KD
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shRNA是TCRN系列，請RNAi core 協助包成病毒的
我沒有GFP virus，只有scramble;
但不論是scramble 或是target組, infect完puro藥篩 存活率有8-9成 (沒感染的全死
所以送進去的效率應該是好的
※ 編輯: tynse71864 (140.109.113.67), 08/05/2018 20:48:06
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剛從家裡冰箱翻到……
可能順便測試 RNAiMAX / Genmute
有 data會在回報的，感謝大家
※ 編輯: tynse71864 (223.137.121.177), 08/07/2018 13:42:46
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