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293T 細胞養法

看板Biotech (生命科學)作者 (linotox_992)時間6年前 (2018/08/13 13:23), 編輯推噓12(12推 0噓 23→)
留言35則, 15人參與, 6年前最新討論串1/1
最近老闆跟別人要了一罐293T要我養 在網上搜尋到相關資訊 培養基 DMEM+10%FBS 繼代的話用 trypsin 將細胞打下來 這個細胞容易飄跟結塊 我看ATCC上寫加trypsin後不可以搖動敲擊 放在培養箱裡培養之後 拿出來要先加medium才能打不然會結塊 網上又有搜尋到不能讓他長滿大概八分滿 除了這些還有什麼需要注意的嗎>< —- 對了我在網上搜尋相關養法的時候看到的簡體字網站比較多欸..這是正常的嗎？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.102.23 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1534137836.A.F53.html
推
08/13 15:45, 6年前 , 1F
PBS不要沖太大力
08/13 15:45, 1F
推
08/13 19:52, 6年前 , 2F
我都直接用PBS沖下來，不會另外用trypsin打下來
08/13 19:52, 2F
推
08/13 20:00, 6年前 , 3F
放心 這株怎麼養都不會死的
08/13 20:00, 3F
→
08/13 23:09, 6年前 , 4F
奇怪 我找是英文比較多耶 之前養這隻的助理說這個丟進
08/13 23:09, 4F
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08/13 23:09, 6年前 , 5F
垃圾桶都會長
08/13 23:09, 5F
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08/14 00:10, 6年前 , 6F
ATCC都會寫超詳細啊 大家有沒有follow就是另一回事XDD
08/14 00:10, 6F
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08/14 00:11, 6年前 , 7F
這株cell line很好養 搖動敲擊那邊應該沒差 但要加medium打
08/14 00:11, 7F
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08/14 00:11, 6年前 , 8F
以終止trypsin activity沒錯
08/14 00:11, 8F
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08/14 10:02, 6年前 , 9F
google 239T culture->英文為主 293T 培養->簡體字一堆
08/14 10:02, 9F
推
08/14 19:57, 6年前 , 10F
用versene就好了，不用用到trypsin
08/14 19:57, 10F
推
08/15 12:59, 6年前 , 11F
我們實驗室是用citric saline讓細胞下來，我有同學直
08/15 12:59, 11F
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08/15 12:59, 6年前 , 12F
接拿新的培養液暴力衝下來，都沒死
08/15 12:59, 12F
推
08/15 13:53, 6年前 , 13F
這株養就對了
08/15 13:53, 13F
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08/15 16:20, 6年前 , 14F
還是得說一句，雖然這株幾乎細胞隨便養medium隨便餵都
08/15 16:20, 14F
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08/15 16:21, 6年前 , 15F
能活，但是養的不好還是會影響細胞增殖速度和transfect
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08/15 16:21, 6年前 , 16F
效率。
08/15 16:21, 16F
推
08/16 15:27, 6年前 , 17F
推樓上，養得活只是最低標準，有沒有得到想要的
08/16 15:27, 17F
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08/16 15:27, 6年前 , 18F
效果，還是要自己檢測
08/16 15:27, 18F
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08/16 15:29, 6年前 , 19F
所謂養就對了只是給beginner的信心，不是指隨便喔
08/16 15:29, 19F
推
08/18 13:46, 6年前 , 20F
養了一年的過來人跟您分享..這株細胞很好養，但貼附能
08/18 13:46, 20F
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08/18 13:46, 6年前 , 21F
力確實比其他癌細胞來的弱。
08/18 13:46, 21F
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08/18 13:46, 6年前 , 22F
基本上DPBS沖洗大力一點就下來了，但還是建議用Trypsi
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08/18 13:46, 6年前 , 23F
n讓細胞分離比較好，處理時間不用1分鐘。剩下的就照一
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08/18 13:46, 6年前 , 24F
般培養細胞的方式就好。以10倍稀釋下去養，三天滿盤不
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08/18 13:46, 6年前 , 25F
是問題。
08/18 13:46, 25F
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08/18 13:48, 6年前 , 26F
如果你是要用這株細胞做實驗，加藥品的力道跟時間都是
08/18 13:48, 26F
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08/18 13:48, 6年前 , 27F
考慮因素，不然絕對飄起來給你看。
08/18 13:48, 27F
推
08/18 20:59, 6年前 , 28F
細胞很小顆，種的時候可以種多一點
08/18 20:59, 28F
推
08/18 22:34, 6年前 , 29F
樓上，可是他長很快阿 QAO
08/18 22:34, 29F
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08/20 16:20, 6年前 , 30F
293t隨便養都活
08/20 16:20, 30F
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08/20 16:21, 6年前 , 31F
繼代也懶得拿酵素 直接medium沖一沖再離掉就好
08/20 16:21, 31F
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08/20 16:21, 6年前 , 32F
別爆盤都沒事
08/20 16:21, 32F
推
08/23 11:22, 6年前 , 33F
medium沖比用trypsin好 trypsin作用要在一分鐘內終止反應
08/23 11:22, 33F
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08/23 11:22, 6年前 , 34F
要不然很容易掛
08/23 11:22, 34F
推
08/24 09:50, 6年前 , 35F
Trypsin加進去晃一圈後吸掉，再用medium把細胞沖下來
08/24 09:50, 35F
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