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[求救] Polyacrylamide DNA gel 跑膠問題

看板Biotech (生命科學)作者 (RAYPTT)時間6年前 (2018/09/18 11:43), 編輯推噓1(1推 0噓 6→)
留言7則, 3人參與, 6年前最新討論串1/1
各位好， 請問在跑polyacrylamide DNA gel的實驗中， 若發生核酸只出現於Lane的左右兩側(特別是1, 1+)，無法形成完整的Band時， 可能會是什麼問題所導致，應該用什麼方法解決？ 非常感謝。 Gel圖： https://imgur.com/XR4Em4B
實驗設計： 5% Polyacrylamide, 1xTBE, EtBr後染，25-30V, 2-3 hr, 各Lane分別為 M= 100bp DNA ladder; 1 .2 .3 = modified chromatin-IP DNA 進行PCR之產物 (10ul); 1+.2+.3+= modified chromatin-IP DNA 進行PCR之產物 (30ul); NC= no template negative PCR control. PS. Sample是以Column purifed的chromosome DNA sample，再進行PCR後跑膠 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.121.103 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1537242218.A.331.html
推
09/18 19:23, 6年前 , 1F
跑 DNA 不熟…跑蛋白時倒是發現如果樣本體積太小，或
09/18 19:23, 1F
→
09/18 19:23, 6年前 , 2F
沒混勻 (比如先加 dye 再 load一點點 Mr) 就會卡兩側
09/18 19:23, 2F
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09/18 19:27, 6年前 , 3F
解決方法 1.提升樣本總體積，補1x bfr。 2. 稍加pipet
09/18 19:27, 3F
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09/18 19:27, 6年前 , 4F
樣本，混勻 (gel well內或 tube 先 mix好都可以)
09/18 19:27, 4F
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09/18 19:46, 6年前 , 5F
我猜well有鹽類析出,跑膠前對每個well都pipet一下
09/18 19:46, 5F
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09/18 20:14, 6年前 , 6F
overloading吧 看起來你的東西沒有需要用到page啊 aga
09/18 20:14, 6F
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09/18 20:14, 6年前 , 7F
rose不行嗎
09/18 20:14, 7F
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