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[求救] Transwell染色後分析

看板Biotech (生命科學)作者 (生科小菜雞)時間5年前 (2019/04/08 00:29), 編輯推噓6(6推 0噓 5→)
留言11則, 5人參與, 5年前最新討論串1/1
各位前輩大家好 先來個前情提要 我對Transwell 完全就是新手 參考youtube abnova migration assay的protocol 後來微調用4%福馬林 fix 30min 0.5% crystal violet 染色 30 min 之後用PBS wash刮除上層細胞 在顯微鏡視野下有裂痕（皺摺） 是因為棉花棒戳的太大力嗎？ 我目前是把chamber放在玻片上 但是發現很難對焦 （膜上小孔對焦，但染上紫色的細胞無法） 難道只能把膜割下來嗎？ （割下來邊緣都翹起，用蓋玻片也很難壓平） 不知道板上有沒有推薦的撇步呢？ 希望前輩們不吝指教！ 站內信留言都可以！感謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 118.150.171.135 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1554654540.A.426.html
推
04/08 18:21, 5年前 , 1F
目前也正在做，可以嘗試用10% acetic acid將crystal viol
04/08 18:21, 1F
→
04/08 18:21, 5年前 , 2F
et 去染，然後看是否要用ddH20稀釋後去測吸光值。（不知
04/08 18:21, 2F
→
04/08 18:21, 5年前 , 3F
是否是我細胞數過多，感覺染完的細胞不太好數）
04/08 18:21, 3F
推
04/10 13:59, 5年前 , 4F
裂痕可能是太用力了。不用割下來這麼麻煩，直接放在
04/10 13:59, 4F
推
04/10 14:01, 5年前 , 5F
載玻片上就可以拍照了
04/10 14:01, 5F
推
04/13 14:01, 5年前 , 6F
載玻片上滴一滴PBS，不要有氣泡，就比較好聚集
04/13 14:01, 6F
推
04/13 14:04, 5年前 , 7F
Chamber保持濕潤（但不是一直泡PBS)，細胞才不會縮
04/13 14:04, 7F
→
04/25 16:04, 5年前 , 8F
謝謝大家分享我再試看看！
04/25 16:04, 8F
推
06/25 13:29, 5年前 , 9F
我是直接把正面chamber放在破片上用顯微鏡看耶！這樣跟
06/25 13:29, 9F
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06/25 13:29, 5年前 , 10F
割下來不是一樣嗎？ 記得等風乾之後在去看，染色的細胞
06/25 13:29, 10F
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06/25 13:29, 5年前 , 11F
才不會被弄下來
06/25 13:29, 11F
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