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[求救] Elisa standard 的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (s505015b大)時間5年前 (2019/05/19 22:48), 編輯推噓7(7推 0噓 11→)
留言18則, 6人參與, 5年前最新討論串1/1
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓， 請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪 除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 如題 最近做Elisa 也跑出一些東西 但是有件很奇怪的事 我是測ova antibody 是用direct Elisa Elisa中做出來的standard是用序列稀釋 但是standard做出來 會是有點曲線 像這個樣子 https://i.imgur.com/1CuHvSb.jpg
當時覺得怪 但是看到有些人說把濃度取log2 就可以 我自己用也發現會很合 但是我印象elisa是用beer law 所以取log2就很奇怪 而且如果是beer law 那吸光值會正比濃度 但是也fit不起來 其他人做出來也是這樣 請大家幫幫忙 給點提示 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.162.61.70 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1558277315.A.97B.html
推
05/20 07:32, 5年前 , 1F
不奇怪吧,本來線性關係就在一定的濃度範圍裡
05/20 07:32, 1F
→
05/20 07:34, 5年前 , 2F
ELISA還要考慮immobilize,你antigen濃度高到把well都
05/20 07:34, 2F
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05/20 07:35, 5年前 , 3F
填滿之後就不可能是線性了
05/20 07:35, 3F
推
05/20 12:35, 5年前 , 4F
簡單的說就是你的線性範圍有限 把高濃度踢掉應該就會直了
05/20 12:35, 4F
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05/20 12:36, 5年前 , 5F
可以考慮加高substrate濃度看看吸光能不能拉上來
05/20 12:36, 5F
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05/20 15:32, 5年前 , 6F
不能
05/20 15:32, 6F
推
05/20 15:37, 5年前 , 7F
本來就不會是線性吧 而且好像也沒人真的fit log的方程
05/20 15:37, 7F
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05/20 15:37, 5年前 , 8F
式都馬挑兩個點內插
05/20 15:37, 8F
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05/20 17:46, 5年前 , 9F
但這樣挑會不會很危險
05/20 17:46, 9F
推
05/20 21:56, 5年前 , 10F
會在那個ball park啊 需要那麼精準定量你就打MS或AAA
05/20 21:56, 10F
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05/20 21:56, 5年前 , 11F
吧
05/20 21:56, 11F
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05/20 21:58, 5年前 , 12F
挑最近的兩個點一上一下 差也不會差到看不到整體的tre
05/20 21:58, 12F
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05/20 21:58, 5年前 , 13F
nd
05/20 21:58, 13F
推
05/26 15:35, 5年前 , 14F
不然就把樣本稀釋到吸光值落在你覺得可信的線性範圍內去比？
05/26 15:35, 14F
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05/27 16:34, 5年前 , 15F
也是可以 但是蠻麻煩ㄉ
05/27 16:34, 15F
推
05/27 17:08, 5年前 , 16F
啊你就用log去fit啊 也沒差
05/27 17:08, 16F
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05/29 09:33, 5年前 , 17F
通常就是稀釋啦
05/29 09:33, 17F
推
06/03 03:03, 5年前 , 18F
去查4 parameter logistic function
06/03 03:03, 18F
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