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[求救] 細胞實驗-藥物濃度的計算

看板Biotech (生命科學)作者 (Anng)時間5年前 (2019/06/06 00:34), 5年前編輯推噓2(2推 0噓 27→)
留言29則, 4人參與, 5年前最新討論串1/1
各位前輩大大好, 小妹我最近需要做一個加藥的細胞實驗,但由於我化學濃度的計算真的很弱…, 試著在網 路上看計算公式算,但花了半天的時間我還是不會QQ 所以希望有人能幫忙,如果能附上計算公式就更好了, 感激不盡!! (我好想搞懂這些濃度 間的計算/換算阿….) 實驗敘述: 需將兩個藥物加入養在35mm dish裡的細胞(是suspension cell), dish裡面會有 2ml的 medium A. 藥物一是Estradiol且最後的作用濃度需為0.1nM。分子量是272.38, 我有250mg, data sheet 上的敘述是說先用ethanol配置出20 μg/ml stock solution。可是該如何計 算與配製這個藥物,最後加入細胞後才會是0.1nM的作用濃度? B. 藥物二是 estrogen receptors的抑制劑, 最後的作用需 為濃度10^?-7 μM。分子量 是 387.51, 我有5mg, 也是會溶於ethanol。也是同樣的問題,我該如何配製, 最後加入細胞 後才會是10^?-7 μM作用濃度? 先謝謝各位前輩大大了! 預祝端午佳節愉快! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 92.32.8.181 (瑞典) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1559752481.A.CFA.html
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06/06 01:19, 5年前 , 1F
第一個藥應該不是直接配成你的 stock，濃度差太多
06/06 01:19, 1F
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06/06 01:20, 5年前 , 2F
摩爾濃度 (M) = mole/L，1 M 的溶液如果有 1 L，裡面
06/06 01:20, 2F
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06/06 01:21, 5年前 , 3F
就有 1 mole 的溶質；重量百分濃度應該不用解釋吧？
06/06 01:21, 3F
謝謝解釋^_^
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06/06 01:22, 5年前 , 4F
分子量的定義是 1 mole 的該物質會有幾 g 重。
06/06 01:22, 4F
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06/06 01:24, 5年前 , 5F
如果照你所說第一個藥先配成 20 μg/mL，你要用 12.5 L
06/06 01:24, 5F
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06/06 01:24, 5年前 , 6F
的酒精去配，實驗室不會幹這種蠢事.......
06/06 01:24, 6F
Data sheet 上面是說，用1ml 酒精與1mg的藥物一溶，再加入49 ml medium 配成 stock 。如果stock是20ug/ml，我該如何操作加藥才能是最後的0.1nM作用濃度呢 @@
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06/06 01:25, 5年前 , 7F
建議你去查一下第一個藥對酒精的最大溶解度，比較可能
06/06 01:25, 7F
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06/06 01:26, 5年前 , 8F
的配法是先配成幾 mL 可能是 10~100 mg/mL 的保存溶液
06/06 01:26, 8F
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06/06 01:26, 5年前 , 9F
，再取出部分稀釋成 20 μg/mL 並分裝保存。
06/06 01:26, 9F
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06/06 01:30, 5年前 , 10F
瑞典！？
06/06 01:30, 10F
對 遠在瑞典的求救@@ ※ 編輯: momo2355115 (92.32.8.181 瑞典), 06/06/2019 02:41:08
推
06/06 08:47, 5年前 , 11F
第一個酒精是2.5mg/ml , dmso 則是 20mg/ml ; 看是否
06/06 08:47, 11F
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06/06 08:47, 5年前 , 12F
溶在 DMSO中會比較好處理
06/06 08:47, 12F
推
06/06 08:51, 5年前 , 13F
若是 DMSO 飽和濃度相當于 20/272.34/1= 0.0734M (有
06/06 08:51, 13F
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06/06 08:51, 5年前 , 14F
錯樓下請救我)
06/06 08:51, 14F
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06/06 16:36, 5年前 , 15F
我有個小小疑問 酒精會揮發這樣的stock濃度準嗎??
06/06 16:36, 15F
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06/06 16:37, 5年前 , 16F
因為我是習慣用DMSO溶的
06/06 16:37, 16F
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06/06 16:50, 5年前 , 17F
我的習慣是將藥配成final濃度的1000x 加藥時直接1000x稀釋
06/06 16:50, 17F
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06/06 16:52, 5年前 , 18F
所以dish裡2ml 就加2μl的藥
06/06 16:52, 18F
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06/06 16:53, 5年前 , 19F
依照你目前的條件 A藥 1.先算出20μg/ml(20μg,1ml)是多少M
06/06 16:53, 19F
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06/06 16:56, 5年前 , 20F
然後再把它調成0.1uM，然後加藥時2ml加2ul，final就會是
06/06 16:56, 20F
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06/06 16:56, 5年前 , 21F
0.1nM
06/06 16:56, 21F
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06/06 16:58, 5年前 , 22F
B藥也是照這邏輯配
06/06 16:58, 22F
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06/06 17:00, 5年前 , 23F
只是我的小疑問酒精揮發及medium配的保存上會不會容易汙染?
06/06 17:00, 23F
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06/06 17:14, 5年前 , 24F
如果是我的話會直接用DMSO配成10mM的stock，要用的時候再1
06/06 17:14, 24F
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06/06 17:14, 5年前 , 25F
0x連續稀釋到0.1uM
06/06 17:14, 25F
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06/06 17:15, 5年前 , 26F
(有錯的話請小力鞭）
06/06 17:15, 26F
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06/06 18:42, 5年前 , 27F
放-20不怕酒精揮發,加到medium後,更不擔心揮發了
06/06 18:42, 27F
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06/06 18:44, 5年前 , 28F
E2我是配成10mM與10uM的stock,用之前在外加入medium
06/06 18:44, 28F
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06/06 19:02, 5年前 , 29F
感謝樓上（？）答覆
06/06 19:02, 29F
謝謝大家的答覆、協助與解釋！！ 最後我的確是用酒精配置E2，stock儲存在-20.，再同大家所說的連續稀釋！ 謝謝大家，祝福各位前輩的實驗超級順利:D ※ 編輯: momo2355115 (94.234.36.154 瑞典), 06/13/2019 02:00:17
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