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[求救] western 的band長短不一

看板Biotech (生命科學)作者 (Marshall Wang)時間5年前 (2019/09/25 17:31), 5年前編輯推噓5(5推 0噓 8→)
留言13則, 5人參與, 5年前最新討論串1/1
實驗室用的快速膠，在製膠的過程中是用dropper加的，過程加的也算均勻，不過中間有些? 然後在running跟transfer的過程也算順利 Transfer時除了一開始buffer不夠以外後續就是洗再來加抗體，這次用的是分子量37的GAPD 但是在ECL成色出來的結果band的大小很不均勻 而且中間那條band還特別長特別大還往上跑 原因可能是哪些？拜託求救，失敗很多次了 ----- Sent from JPTT on my iPhone -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.115.48.183 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1569403888.A.5F5.html
推
09/25 19:42, 5年前 , 1F
樣品體積都一樣嗎？
09/25 19:42, 1F
對沒錯就是那個快速膠，至於樣品體積你是說打入well的體積嗎？沒有欸，每個樣品配出來
→
09/25 19:43, 5年前 , 2F
btw 原 po 買的是 TGX 快速膠嗎
09/25 19:43, 2F
推
09/25 20:48, 5年前 , 3F
看到圖回憶起我大學的Data
09/25 20:48, 3F
※ 編輯: pk1512 (117.19.213.82 臺灣), 09/25/2019 23:57:59
推
09/26 02:10, 5年前 , 4F
以前實驗室是教用等重的protein sample和sample buffer配
09/26 02:10, 4F
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09/26 02:10, 5年前 , 5F
好跑電泳的sample後，用1x sample buffer把體積調至一樣
09/26 02:10, 5F
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09/26 02:10, 5年前 , 6F
，這樣才不會體積大的band擠到旁邊體積小的band
09/26 02:10, 6F
→
09/26 02:12, 5年前 , 7F
快速膠沒用過就不知道是不是那個的問題了
09/26 02:12, 7F
推
09/26 10:40, 5年前 , 8F
同樓上 樣品體積不同的話補1X sample buffer 調到一樣
09/26 10:40, 8F
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09/26 14:57, 5年前 , 9F
sample 調成同濃度同體積,這樣在load sample 直接取同量體積
09/26 14:57, 9F
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09/26 15:00, 5年前 , 10F
可試 stacking running 時間加長,跑慢,之後調正常running
09/26 15:00, 10F
※ 編輯: pk1512 (140.115.48.183 臺灣), 09/26/2019 15:12:39
推
09/26 15:15, 5年前 , 11F
調一下體積至相同就可解決了，我之前是卡在 transfer
09/26 15:15, 11F
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09/26 15:15, 5年前 , 12F
3分鐘 20k以下全部不見了，後來發現是 transfer tank
09/26 15:15, 12F
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09/26 15:15, 5年前 , 13F
問題; 跑膠部分則沒有狀況
09/26 15:15, 13F
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