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[求救] plasmid設計位置

看板Biotech (生命科學)作者 (hikyla)時間5年前 (2019/10/02 19:45), 5年前編輯推噓1(1推 0噓 11→)
留言12則, 4人參與, 5年前最新討論串1/1
（帶朋友問） 不好意思重 新整理一下 大家好 請問一下 把egfp跟sumo放在我們目標基因後,哪個比較好呀？還是只要找到他的切割位點 其實都沒 差啊？我們要把sumo放在目標基因後面 讓大腸桿菌生產蛋白 把sumo放後面 是為了先讓蛋 白不要有功用 因為後面還接了一個sumo，隨意目標基因並不會馬上有功用 egfp加的原因是要幫助辨識 可是我們現在把egfp加到目標基因後面 因為我們有他的切割酶 請問這樣對暫時不讓蛋白產生功能有影響嗎 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 115.82.227.149 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1570016747.A.5E7.html
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10/02 19:46, 5年前 , 1F
1. 代啦幹
10/02 19:46, 1F
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10/02 19:46, 5年前 , 2F
2. 理喜咧公三小？
10/02 19:46, 2F
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10/02 19:47, 5年前 , 3F
好啦...有點太粗口了 XD，你沒說放那兩個要幹什麼，我
10/02 19:47, 3F
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10/02 19:48, 5年前 , 4F
們沒辦法幫你回答你的問題啊。找到切割位點指的又是什
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10/02 19:48, 5年前 , 5F
麼？EGFP是螢光標記還算好猜要幹嘛，但放SUMO又是為什
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10/02 19:48, 5年前 , 6F
麼？
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※ 編輯: hikyla (115.82.227.149 臺灣), 10/02/2019 19:55:15 ※ 編輯: hikyla (115.82.227.149 臺灣), 10/02/2019 19:57:16
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10/02 20:15, 5年前 , 7F
GFP在前或在後各做一個，看哪個能work
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10/02 20:16, 5年前 , 8F
給大腸桿菌表現fusion protein有時候要都試試看
10/02 20:16, 8F
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10/02 20:19, 5年前 , 9F
然後一次做兩種的成本比較低
10/02 20:19, 9F
推
10/06 15:30, 5年前 , 10F
放eGFP跟SUMO感覺是不同的實驗目的? 那怎麼能比較啊?
10/06 15:30, 10F
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10/14 03:52, 5年前 , 11F
兩個都做，試了才知道
10/14 03:52, 11F
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10/14 03:53, 5年前 , 12F
但是sumo放C端就不能用senp2切，要換別的protease切位
10/14 03:53, 12F
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