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[求救] plasmid loading在nanoparticle一直失敗

看板Biotech (生命科學)作者 (chin.1113)時間3年前 (2021/04/14 11:51), 3年前編輯推噓1(1推 0噓 5→)
留言6則, 4人參與, 3年前最新討論串1/1
大家好， 我的實驗主要的目的是想知道plasmid loading ratio， 我按照paper上的做法，將我的nanoparticle跟plasmid混合後，室溫放置30min， 之後進行DNA電泳實驗，膠用的比例是1% agarose + 0.5x TAE，電泳槽是用0.5x TAE， 100v 30mins 跑出來的結果如下， https://imgur.com/gs64d9B
看起來都沒有好好的loading上去，想請問大家有沒有類似的經驗， 或是paper上沒寫到的技巧 另外因為是用plasmid，所以跑出比較粗是正常的嗎? 我用的比例是0.1ug/ul，是否還是太高? 困惑了很久，不知道哪裡有出錯，再拜託各位高手了... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.73.123.135 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1618372272.A.C90.html
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04/14 23:42, 3年前 , 1F
今天又在試一次，結果還是不如意，崩潰ㄚㄚㄚㄚ，跪求各
04/14 23:42, 1F
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04/14 2, , 2F
位，幫助小妹我了Day ...
04/14 2, 2F
3:43
推
04/15 01:38, 3年前 , 3F
nanoparticle成分是什麼呢？
04/15 01:38, 3F
是carbon dot
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04/15 08:22, 3年前 , 4F
你拿多少DNA下去跑？你可以用DNA ladder的比例去換算
04/15 08:22, 4F
一個well 是0.1ug/ul的plasmid，先用1ug/ul plasmid 跟nanoparticle用各種比例去混 合 請問用ladder比例換算是什麼意思？
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04/15 08:25, 3年前 , 5F
下次不要連架子都拿去照
04/15 08:25, 5F
好的 下次會注意
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04/15 14:18, 3年前 , 6F
我把我的一些建議站內給你了 不知道能不能幫上忙
04/15 14:18, 6F
我收到了！已經回覆了 謝謝你！ ※ 編輯: cchinn (140.115.137.98 臺灣), 04/15/2021 15:48:12
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