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[求救] DNA Purification binding buffer問題

看板Biotech (生命科學)作者 (台中彭于晏)時間3年前 (2021/06/08 17:08), 編輯推噓4(4推 0噓 11→)
留言15則, 6人參與, 3年前最新討論串1/1
大家好 想請問一個關於DNA純化binging buffer問題 在kit（Thermo）打開使用前 ，binging buffer和washing buffer是需要先加酒精的 Protocol 上是寫要加入濃度96%-100%的酒精 但今天如果只加入濃度95%的酒精對於DNA純化會有影響嗎 若影響是會完全抽不出來亦或是只有影響純化品質 謝謝大家的解惑 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.83.240.154 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1623143324.A.9D1.html
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06/08 19:11, 3年前 , 1F
binding buffer加酒精？
06/08 19:11, 1F
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06/08 19:38, 3年前 , 2F
對呀protocol上這樣寫 binging buffer第一次開封需先加
06/08 19:38, 2F
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06/08 19:38, 3年前 , 3F
入96-100%濃度的酒精
06/08 19:38, 3F
推
06/08 20:25, 3年前 , 4F
可能稍微影響純化品質吧，加入酒精目的在於移除鹽類和蛋白質
06/08 20:25, 4F
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06/08 20:27, 3年前 , 5F
同時也帶走水分，避免核酸被水分拉走，所以才會建議濃度越高
06/08 20:27, 5F
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06/08 20:28, 3年前 , 6F
的酒精越好，濃度不夠的話可能得到核酸量也會稍微減少。至於
06/08 20:28, 6F
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06/08 20:29, 3年前 , 7F
是否會影響純化的核酸種類比率？阿肥這點也不太清楚
06/08 20:29, 7F
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06/08 20:30, 3年前 , 8F
個人認為如果後續反應不會受到鹽類干擾的話，95%應急一下是
06/08 20:30, 8F
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06/08 20:31, 3年前 , 9F
無妨啦～
06/08 20:31, 9F
推
06/09 11:08, 3年前 , 10F
不過95%如果是大桶的工業酒精 (？) 可能會影響到最後D
06/09 11:08, 10F
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06/09 11:09, 3年前 , 11F
NA的純度就是了
06/09 11:09, 11F
推
06/09 19:40, 3年前 , 12F
影響不大，剛開始進實驗室的時候曾經加錯，抽出來跟以
06/09 19:40, 12F
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06/09 19:40, 3年前 , 13F
前比沒有明顯差異
06/09 19:40, 13F
推
06/09 19:42, 3年前 , 14F
加錯的是plasmid extraction跟gel purification的kit
06/09 19:42, 14F
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06/09 23:30, 3年前 , 15F
頂多只會影響純度和品質吧，不至於差個1%就抽不出來啦
06/09 23:30, 15F
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