[求救] western同一片膜但背景有些髒有些乾淨
各位前輩好，最近在做western上遇到了一些問題，想請各位幫幫忙
步驟如下：
running:上膠80 V, 50 min，下膠：130 V, 120 min
transffering:400 mA, 2 hr
blocking: 5%脫脂奶粉, 1 hr
wash三次十分鐘後裁膜加一抗overnight，
隔天回收一抗，wash三次十分鐘加二抗室溫一小時，
再wash三次十分鐘，UVP拍照
這時就出現了同一張膜有的抗體背景乾淨，有的卻很髒，
不知道前輩們是否能幫忙troubleshooting，謝謝！
https://imgur.com/8h3kZt6
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 101.9.172.69 (臺灣)
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1. 位置不同
2. arg-1 1:1000
因為訊號比較弱所以把二抗從1:10000調整到1:5000
※ 編輯: kyuxi0203 (101.9.172.69 臺灣), 08/19/2021 08:44:05
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感謝各位的幫忙~ 配了新的之後好很多了!
※ 編輯: kyuxi0203 (101.9.49.253 臺灣), 08/20/2021 18:04:28
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