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[求救] 請問Tris-Glycine與Bis-Tris系統

看板Biotech (生命科學)作者 (demian)時間1年前 (2023/07/18 23:44), 編輯推噓3(3推 0噓 17→)
留言20則, 5人參與, 1年前最新討論串1/1
各位先進好 個人之前腦波弱買了廠商建議的預鑄Bis-Tris膠，那時候不知道Bis-Tris系統跟原本的Tr is-Glycine差很多，所以跑膠是用Bis-Tris跑，transfer還是用原本的Tris-Glycine+20% Methanol buffer，就這樣也跑了好一陣子… 今天問廠商其它的問題時，她說跑膠跟Transfer的系統要一樣才行…請問假如兩個不一樣 ，會造成結果很大的誤差嗎？真的是好擔心之前做的要丟垃圾桶了… -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 220.132.117.37 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1689695077.A.12E.html
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07/19 00:12, 1年前 , 1F
呃.....你可以問問看廠商跑膠和transfer系統不一樣會
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有什麼問題。然後你仔細想一想，你總有跑marker吧？pr
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otein也該有定量過吧？然後你western blotting有任何
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異常嗎？
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你如果有搞懂整個SDS-PAGE是怎麼運作的，廠商講錯的時
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候就不會被唬的一愣一愣的了，而且很多業務其實只管賣
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，他們自己也許根本也不懂他們的產品是如何運作的。It
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just works! Magic!
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07/19 00:32, 1年前 , 9F
聽到她這樣說的時候我也是很疑惑，畢竟marker也有過去
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，actin什麼的也看起來頗正常。但是自從昨天知道marker
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在兩種buffer中高分子量會跑得不一樣真的很震驚…我用t
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ris-glycine跑非常多年了，說真的她建議我買Bis-Tris
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膠的時候我真的沒仔細了解它們的差異
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推
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參照marker說明書在兩個系統分別標示的對照分子量即可。
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Marker 在不同 PAGE 中是會因為 pH 不同等等因素，跑出
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不同的樣子，而且 marker 本來就只是"參考"，跑起來不
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一樣也不會影響結果
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推
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我同版主這樣做欸 其實轉的過去都還好
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推
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marker算是相對比較 反正這個高度的就是這個分子量
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07/22 12:59, 1年前 , 20F
除非根本跑不開
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