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討論串[問題] help 有關蛋白質純化
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Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓1(1推 0噓 1→)留言2則，0人參與, 最新作者boblu.時間19年前 (2006/12/09 21:25), 編輯資訊
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his-tag 的特性就是會 bind Ni (鎳). NI-NTA 是帶有 Ni 的樹脂顆粒. 把 cell lysate 跟 Ni charged resin incubate 一段時間. （或者是過 column）. his-tagged protein 會黏到上面. wash 以後再用 lo
(還有104個字)
#2
Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/12/09 20:43), 編輯資訊
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Nickle column是利用6H跟nickle親和力極高所衍生出來的純化方法. 方法有兩種. 一種是利用不同濃度的imidazole去競爭與nickle的結合能力. 另一種是利用不同的ph值來讓6H跟nickle的結合能力降低. 兩種都可以將蛋白質純化出來！. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊
#1
[問題] help 有關蛋白質純化
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者aistella (海風。沙)時間19年前 (2006/12/09 17:51), 編輯資訊
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我已經看過精華區了. 可是..裡面的連結網頁. 對於蛋白質純化的原理我還不是很懂= =. 我是用his-tag 標記目標蛋白的. 加 Ni-NTA下去. 利用Urea buffer 的pH濃度越來越低分離出protein. (因為我的protein是inclusion body 的形式表現). 不過
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