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討論串[問題] help 有關蛋白質純化

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#13

Re: [問題] help 有關蛋白質純化

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者aistella (海風。沙)時間19年前 (2006/12/12 13:25)資訊

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謝謝大家. 這地方真是好阿. 我會參考大家的意見的. 希望有一天我也可以幫助大家^^. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 163.25.118.51.

#12

Re: [問題] help 有關蛋白質純化

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者boblu.時間19年前 (2006/12/10 21:35)資訊

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※ 引述《dorphilvet.bbs@ptt.cc ( )》之銘言：. > 嗯，我們的實驗室也是差不多的. > 但如果你用8M的URE去溶的話. > 我們是把8M Urea 加入binding buffer. > 然後去破菌. > 離心後收上層液，你可以在這個地方透析. > 再去純化，跑sds p

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#11

Re: [問題] help 有關蛋白質純化

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者Fourfish (～四條魚～)時間19年前 (2006/12/10 17:26)資訊

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不好意思之前文章沒說的很清楚我的目的是什麼^^". 我是收菌之後先用PBS重新懸浮後破菌. 收pellet （之前以為我的蛋白質在上清液後來才發現原來在pellet裡= ="）. 曾經用PBS重新懸浮pellet （這應該不能叫回溶吧XD）. 加lysis buffer跑SDS PAGE確定我

(還有74個字)

#10

Re: [問題] help 有關蛋白質純化

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者dorphilvet ( )時間19年前 (2006/12/10 17:13)資訊

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嗯，我們的實驗室也是差不多的. 但如果你用8M的URE去溶的話. 我們是把8M Urea 加入binding buffer. 然後去破菌. 離心後收上層液，你可以在這個地方透析. 再去純化，跑sds page. 或是純化的過程中的buffer都要含8M Urea的去泡. 純化後的蛋白wash後用都可

Re: [問題] help 有關蛋白質純化

推噓1(1推 )留言1則，0人參與作者snowtree (blue eyes blue)時間19年前 (2006/12/10 16:33)資訊

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照你的文章來看你有去破菌嗎??. 你只加了 lysis buffer 就要去跑膠了嗎. 步驟應該是 1. pellet回溶 2.破菌 3.純化 4. SDS-PAGE 確認. 你破完菌是可以先跑看看但是你好像沒破菌的樣子 \. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From:

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