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討論串[問題] help 有關蛋白質純化
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#8
Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Fourfish (～四條魚～)時間19年前 (2006/12/10 15:42), 編輯資訊
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不好意思 借這篇順便問個問題@@. 用8M Urea去溶inclusion body之後. 可以直接加SDS PAGE的loading buffer跑SDS PAGE嗎？. 我這樣做反而gel上要的band不見了 而底部有一兩條很濃的band...= =". 如果不care protein的stru
#7
Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者longy (longy)時間19年前 (2006/12/10 15:16), 編輯資訊
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※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：我如果要純化inclusion body的protein的話我是會用含8M urea的buffer先去破inclusion body. 也順便把蛋白質denature 溶在buffer中. 然後去過colum
(還有74個字)
#6
Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu.時間19年前 (2006/12/10 13:25), 編輯資訊
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補充一下. Qiagen 的網站上有 Ni-NTA 的手冊可以下載. 很詳細 原理跟各種不同需求的實驗步驟都有講到. 瞄了一下 我自己都很希望我以前有在跑 his column 的時候有這本.... http://www1.qiagen.com/Products/Protein/Purificati
(還有85個字)
#5
Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu.時間19年前 (2006/12/10 13:15), 編輯資訊
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※ 引述《aistella.bbs@ptt.cc (海風。沙)》之銘言：. > ※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：. > : his-tag 的特性就是會 bind Ni (鎳). > : NI-NTA 是帶有 Ni 的樹脂顆粒. > : 把
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#4
Re: [問題] help 有關蛋白質純化
推噓2(2推 0噓 2→)留言4則，0人參與, 最新作者aistella (海風。沙)時間19年前 (2006/12/10 01:45), 編輯資訊
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※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：. 請問urea是要用來denature protein的用意. 是否是要讓protein變成線狀好跑SDS-PAGE來分析?!. 還有阿... 如果說低pH的urea buffer 易讓protein de
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