Re: [問題] help 有關蛋白質純化
※ 引述《dorphilvet.bbs@ptt.cc ( )》之銘言：
> 嗯，我們的實驗室也是差不多的
> 但如果你用8M的URE去溶的話
> 我們是把8M Urea 加入binding buffer
> 然後去破菌
> 離心後收上層液，你可以在這個地方透析
> 再去純化，跑sds page
> 或是純化的過程中的buffer都要含8M Urea的去泡
> 純化後的蛋白wash後用都可以用imidazole去把蛋白elute下來
> 但你都要透析哦
> ps你直接加lysis buffer是想要跑page後，不染色而去切gel來純化嗎
Urea 對 SDS-PAGE應該是沒影響
我用的那本手冊裡面有寫
事實上也沒有碰到過什麼問題
反而要注意的應該是 buffer 的離子濃度跟 pH
至於lysis buffer 溶完，或者是 elute 下來尚未透析時跑 SDS
我想很正常吧
每一個步驟都留一點東西下來跑 PAGE 這樣出問題才有得檢查啊
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莫非定律:
到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上
補充定律:
拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考
--
※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: ppp-70-227-5-184.dsl.bcvloh.ameritech.net
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