Re: [問題] help 有關蛋白質純化
※ 引述《aistella (海風。沙)》之銘言:
: 我已經看過精華區了
: 可是..裡面的連結網頁
: 對於蛋白質純化的原理我還不是很懂= =
: 我是用his-tag 標記目標蛋白的
: 加 Ni-NTA下去
: 利用Urea buffer 的pH濃度越來越低分離出protein
: (因為我的protein是inclusion body 的形式表現)
: 不過我根本不知道加Ni-NTA是為什麼
: 不同pH濃度的Urea 又分別是幹麻
: 請知道的人幫幫我
: 我很急的想知道><
: 感激不進
Nickle column是利用6H跟nickle親和力極高所衍生出來的純化方法
方法有兩種
一種是利用不同濃度的imidazole去競爭與nickle的結合能力
另一種是利用不同的ph值來讓6H跟nickle的結合能力降低
兩種都可以將蛋白質純化出來!
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