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[ Biotech ]
討論串[求救] 抽pasmid的量都好少
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改回傳統方法抽 就用聖經上方法. 也不用過PHENOL-CHOROFORM. dna雖髒了點 不過限制酵素還是切的開. 不過回溶後還是要加RNAase. 一切回歸自然. 我的insert dna 有12KB或 13 KB. 基本上也都沒什麼問題. PLASMID本身在CELLS內的copy numb
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請問你是transform什麼樣子的plasmid進去E.coli。有時候E.coli遇到不喜歡的. plasmid產量就會很少,就算是你增加體積,抽出來足夠的plasmid以後,用enzyme. 切過就會出現smear!!我猜你的plasmid可能很大,所以一看到smear你就以為是genomic
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我最近也在用Promega Wizard Plus SV Minipreps DNA Purification System. 也是問題連連. 我慣常養2ml culture (in falcon 14ml tube), 16hr, 150-200 rpm. transfer 1.5ml到小離心管
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