討論串[求救] 抽pasmid的量都好少
共 16 篇文章

推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者tyhong (prion)時間19年前 (2006/12/23 00:35), 編輯資訊
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改回傳統方法抽 就用聖經上方法. 也不用過PHENOL-CHOROFORM. dna雖髒了點 不過限制酵素還是切的開. 不過回溶後還是要加RNAase. 一切回歸自然. 我的insert dna 有12KB或 13 KB. 基本上也都沒什麼問題. PLASMID本身在CELLS內的copy numb
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推噓2(2推 0噓 1→)留言3則,0人參與, 最新作者puec時間19年前 (2006/12/20 12:30), 編輯資訊
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說實話,幾年前我也聽過這種抱怨,也是說"用promega的kit抽出來的量很少"。. 但是一直以來我用promega都沒有什麼問題,建議你們去找specialist討論看看。. 用invitrogen抽出來的DNA最好跑一下電泳看看有沒有RNA contamination。. --. 發信站:

推噓2(2推 0噓 5→)留言7則,0人參與, 最新作者aggaci (學鋼琴,左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/12/18 18:22), 編輯資訊
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我不這麼覺得.... 我們lab用這組maxi kit通通都說很難用. 換invitrogen的kit,結果量都超高....maxi可以抽到2mg(1ug/1ul)的plasmid. 換clonetech的Maxi,結果也一樣. 不過這組quality差一點,260/280 Ration 1.7左右

推噓2(2推 0噓 2→)留言4則,0人參與, 最新作者puec時間19年前 (2006/12/18 17:27), 編輯資訊
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請問你是transform什麼樣子的plasmid進去E.coli。有時候E.coli遇到不喜歡的. plasmid產量就會很少,就算是你增加體積,抽出來足夠的plasmid以後,用enzyme. 切過就會出現smear!!我猜你的plasmid可能很大,所以一看到smear你就以為是genomic
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推噓3(3推 0噓 8→)留言11則,0人參與, 最新作者bluejelly (夢裡不知身是客)時間19年前 (2006/12/18 12:06), 編輯資訊
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我最近也在用Promega Wizard Plus SV Minipreps DNA Purification System. 也是問題連連. 我慣常養2ml culture (in falcon 14ml tube), 16hr, 150-200 rpm. transfer 1.5ml到小離心管
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