討論串(共16篇) - [求救] 抽pasmid的量都好少 - 看板Biotech

看板 [ Biotech ]

討論串[求救] 抽pasmid的量都好少

共 16 篇文章

排序：最新先 | 最舊先 | 留言數 | 推文總分

內容預覽：開啟 | 關閉 | 只限未讀

首頁

尾頁

Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者puec時間19年前 (2006/12/15 18:14)資訊

內容預覽:

再多嘴一句，如果妳用得是promega的midi-prep kit的話，記得最後一步. 離心dry乾的動作要多做幾次，或者是加做一次酒精沈澱。. 不過這根產量低是比較沒有關係啦，只是這樣真的會比較好優～. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 220.130.218.

Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

推噓2(2推 )留言2則，0人參與作者puec時間19年前 (2006/12/15 17:38)資訊

內容預覽:

恩，妳的菌養太老了。解決的方法有兩個. 1: 增加抗生素的濃度，(100ug/ml for ampicillin or 25 ug/ml for Kanamycin). 2. 縮短養菌的時間。. 妳可能會問，妳是照protocol養16小時，為什麼會太老。有幾個可能性. a. 妳的抗生素加太少。抗生

(還有529個字)

Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者longy (衝創)時間19年前 (2006/12/15 14:09)資訊

內容預覽:

幫補充幾點我的經驗是. 一個reaction大概可以抽6ml的菌液(最多). 但是我怕效率不好所以我每一個reaction都只做3ml. 然後一次做六管這樣就18ml了在回溶之前可以放在60-80度的水浴上. 因為wash buffer都含有酒精. 如果酒精殘留在membrane上. 可能會

Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者u8524009 (VIP好人卡....)時間19年前 (2006/12/14 20:56)資訊

內容預覽:

1.因為你是用Kit抽plasmid,所使用的column都有可以容納DNA量的上限,. 過多的的菌並不會讓所抽的DNA變多,反而會讓你所加的Solution 1,2,3效果變差. 最好是依照portocol上所建議的菌液體積來進行實驗,. 若所需要的DNA要很多,可以將搖的菌多分成幾管來進行,不要

Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

推噓2(2推 )留言6則，0人參與作者circleming (新世紀音樂)時間19年前 (2006/12/14 17:55)資訊

內容預覽:

我不知道你的實際情形為何，. 像我之前做過有點詭異的一次也是類似你的情形，. （我使用的是QUIGEN出的mini-prep）. 一開始我以為會不會是該vector為low copy number. 但應該不可能，因為該vector就是賣來做cloning的.... 所以我想說就將養久一點....

(還有296個字)

首頁

尾頁