Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
※ 引述《u8524009 (VIP好人卡....)》之銘言：
幫補充幾點
: 1.因為你是用Kit抽plasmid,所使用的column都有可以容納DNA量的上限,
: 過多的的菌並不會讓所抽的DNA變多,反而會讓你所加的Solution 1,2,3效果變差
: 最好是依照portocol上所建議的菌液體積來進行實驗,
: 若所需要的DNA要很多,可以將搖的菌多分成幾管來進行,不要全部混合到一管進行實驗.
我的經驗是
一個reaction大概可以抽6ml的菌液(最多)
但是我怕效率不好 所以 我每一個reaction都只做3ml
然後一次做六管 這樣就18ml了
: 2.最後一步用水回溶的體積可以用100ul,並且注意最後加的時候,是加到column的中間,
: 最後再用真空乾燥濃縮DNA,這樣可以增加所抽取出來DNA的量
在回溶之前 可以放在60-80度的水浴上
因為wash buffer都含有酒精
如果酒精殘留在membrane上
可能會導致回溶效率不好
有幾家KIT的protocol上也有這樣的建議
提供你參考
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.99.119
討論串 (同標題文章)
本文引述了以下文章的的內容：
完整討論串 (本文為第 4 之 16 篇)：
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
67
162