Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
※ 引述《bloodgas (奶油ˊ的夢)》之銘言:
: ※ 引述《shuo218 (快樂的理由)》之銘言:
: : 最近在抽plasmid 因為我們實驗室是第一次接觸細菌的實驗
: : 雖然照protocol下去做 可是抽完的濃度都少的可以
: : 下面是我的protocol 還麻煩大家可以幫我解決這個問題
: : 1 colony of successfully pGL-transformed E.Coli to 10ml prewarmed LB+ (in tube)
: : Incubate o/n (16H) 37°C 60rpm
: : 一次培養2管,然後將兩管倒在一起成20ml
: : Centrifuge the 20ml culture at 10,000g x 5min
: : 接下來的步驟都是照promega的protocol做的
: : 不過最後我們是用40ul回溶 因為上次用100ul覺得量太少
: : 結果今天做出來量更少 大概只有0.0125 ug/ul
: : 實在不知道是哪邊出問題
: : 因為後面要切 然後ligase 回收 再送到E.coli
: : 可是前面的量就很少 後面好像根本就沒辦法做下去
: : 大家有什麼好的方法嗎?謝謝!!
: 想先請問一下實驗的細節..你是用什麼管子養菌的,第二個問題是,
: 請問你是用哪一種column抽DNA
1.我是用高速離心管直接下去養的耶,這樣可行嗎?
2.我用的column是跟promega買的
他的kit是這個名字WizardR Plus SV Minipreps DNA Purification System
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 220.140.37.184
推
12/15 22:54, , 1F
12/15 22:54, 1F
→
12/15 22:55, , 2F
12/15 22:55, 2F
推
12/16 00:46, , 3F
12/16 00:46, 3F
→
12/16 00:48, , 4F
12/16 00:48, 4F
→
12/16 00:50, , 5F
12/16 00:50, 5F
→
12/16 00:51, , 6F
12/16 00:51, 6F
推
12/16 15:18, , 7F
12/16 15:18, 7F
推
12/17 00:24, , 8F
12/17 00:24, 8F
討論串 (同標題文章)
本文引述了以下文章的的內容:
完整討論串 (本文為第 9 之 16 篇):
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
67
162