Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

看板Biotech (生命科學)作者 (奶油ˊ的夢)時間19年前 (2006/12/15 18:52), 編輯推噓0(000)
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※ 引述《shuo218 (快樂的理由)》之銘言: : 最近在抽plasmid 因為我們實驗室是第一次接觸細菌的實驗 : 雖然照protocol下去做 可是抽完的濃度都少的可以 : 下面是我的protocol 還麻煩大家可以幫我解決這個問題 : 1 colony of successfully pGL-transformed E.Coli to 10ml prewarmed LB+ (in tube) : Incubate o/n (16H) 37°C 60rpm : 一次培養2管,然後將兩管倒在一起成20ml : Centrifuge the 20ml culture at 10,000g x 5min : 接下來的步驟都是照promega的protocol做的 : 不過最後我們是用40ul回溶 因為上次用100ul覺得量太少 : 結果今天做出來量更少 大概只有0.0125 ug/ul : 實在不知道是哪邊出問題 : 因為後面要切 然後ligase 回收 再送到E.coli : 可是前面的量就很少 後面好像根本就沒辦法做下去 : 大家有什麼好的方法嗎?謝謝!! 想先請問一下實驗的細節..你是用什麼管子養菌的,第二個問題是, 請問你是用哪一種column抽DNA -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.40.41
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