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討論串[求救] 抽pasmid的量都好少
共 16 篇文章
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#11
Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
推噓3(3推 0噓 2→)留言5則，0人參與, 最新作者shuo218 (快樂的理由)時間19年前 (2006/12/16 23:01), 編輯資訊
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恩 看了大家的解答之後. 我想說有些問題想再確認一下. (1)所以接下來的實驗，我打算從養菌重新開始，我想說這次不要養到10ml的菌液，. 大概5ml吧，那接下來我要抽plasmid的時候，需要再把5ml的菌液分裝到1ml的. eppendorf後再開始離心抽plasmid嗎?還是可以直接用5ml下
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#10
Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
推噓1(1推 0噓 1→)留言2則，0人參與, 最新作者puec時間19年前 (2006/12/16 16:51), 編輯資訊
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養了24小時不如就不要做。另外妳的轉速也太低了，一般是150~300rpm都可以，端看. 妳的shaker的迴轉半徑。是不是要問"如何根據shaker的迴轉半徑決定轉速?"...其實只要妳的菌液不會灑出來就好了。shaker是為了要增加溶氧量，只要不會灑出來，基本上是越快越好。. 這樣看來妳好像是沒
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#9
Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
推噓4(4推 0噓 4→)留言8則，0人參與, 最新作者shuo218 (快樂的理由)時間19年前 (2006/12/15 22:30), 編輯資訊
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1.我是用高速離心管直接下去養的耶，這樣可行嗎?. 2.我用的column是跟promega買的. 他的kit是這個名字WizardR Plus SV Minipreps DNA Purification System. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 220.
#8
Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
推噓3(3推 0噓 1→)留言4則，0人參與, 最新作者shuo218 (快樂的理由)時間19年前 (2006/12/15 22:06), 編輯資訊
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先謝謝這位板友精采詳細的解說. 根據大家的解答，我想我也發現了自己的問題. (1)搖菌前，我挑的其實不是colony了，可以說是挑了一坨菌到broth裡面去長，而且搖. 菌的時間還長達快要24小時，所以菌量太多是一個問題所在. 但是我想問，因為我們實驗室用的是DH-5alpha的E.coli，他的c
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#7
Re: [求救] 抽pasmid的量都好少
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者bloodgas (奶油ˊ的夢)時間19年前 (2006/12/15 18:52), 編輯資訊
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想先請問一下實驗的細節..你是用什麼管子養菌的,第二個問題是,. 請問你是用哪一種column抽DNA. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.109.40.41.
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