討論串[問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
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推噓2(2推 0噓 0→)留言2則,0人參與, 最新作者aggaci (學鋼琴,左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/12/28 21:15), 編輯資訊
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引述《mandible》之銘言:. 94度 30s. 60度 30s. 72度 1min. 若GC content > 50% 要加betaine or DMSO. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.114.100.165.

推噓2(2推 0噓 1→)留言3則,0人參與, 最新作者skylawer (skylawer)時間19年前 (2006/12/28 21:13), 編輯資訊
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引述《mandible》之銘言:. 假設 PCR 基本常識中 (Tm, DMSO, hot start....等等) 該試的都試過了. 如果你是從 cDNA or genomic DNA amplify. 要減少 primer dimer 的小方法你可試試. 將你的mixture 分兩管. 每管

推噓4(4推 0噓 1→)留言5則,0人參與, 最新作者werthers6925 (...)時間19年前 (2006/12/28 19:59), 編輯資訊
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引述《mandible》之銘言:. 不知道你的primer設計多長?. 不知道你有沒有查過PCR原理的書籍...... 這裡提供你一些建議:. 設計primer時建議的長度是18~28mer左右. GC%最好在45~65%. primer的3'端最好是C or G 因為會binding的比較緊.
(還有1921個字)

推噓3(3推 0噓 0→)留言3則,0人參與, 最新作者mandible時間19年前 (2006/12/28 18:21), 編輯資訊
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作者: mandible (生化...go go go !!) 看板: Biotech. 標題: [問題] 請問PCR Full-length cDNA?. 時間: Thu Dec 28 18:24:43 2006. PCR很多次了. 還是P不出來. 感覺primer dimer很明顯?. 請問高手
(還有293個字)
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