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討論串[問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
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#9
Re: [問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
推噓5(5推 0噓 0→)留言5則，0人參與, 最新作者mandible (生化...go go go !!)時間19年前 (2007/01/02 21:34), 編輯資訊
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請問各位有free的PCR CDNA FULL-LENGTH的PRIMER DESIGN SOFTWARE嗎?. 請大家告知我..謝謝!!. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 210.85.124.41.
#8
Re: [問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者NARCOS (NARCOS)時間19年前 (2007/01/01 18:48), 編輯資訊
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不知道我講的對不對~~. 我剛看書看到. 針對於full-length cDNA. Primer should frame a sequence as far 3' as possible so that cDNA produced. by oligo(dT) priming needn't not
#7
Re: [問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者mandible (生化...go go go !!)時間19年前 (2006/12/31 10:55), 編輯資訊
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我的data是在100bp以下一定會有的primer dimer. 但是奇怪的就是在100bp上面左右會有primer的tetramer. 是不是就是真的如你所說!我會在逝世看. 我昨天用了55c還是一樣有這種狀況. 跑了這麼久的pcr還是第一次有這種情形.快瘋了. 要投稿的最後兩個data~~唉.
#6
Re: [問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
推噓2(2推 0噓 0→)留言2則，0人參與, 最新作者puec時間19年前 (2006/12/30 18:28), 編輯資訊
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如果你的template是 cDNA，那你可能是碰到了一些secondary structure，. secondary structure可能在你的primer 黏上去以前就形成了，因此佔據了. 你的primer原本應該結合的位置。. 解決方法很簡單，primer做長一點，往3'延伸就可以了。我的
#5
Re: [問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
推噓2(2推 0噓 0→)留言2則，0人參與, 最新作者werthers6925 (...)時間19年前 (2006/12/29 14:49), 編輯資訊
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不好意思, 再補充一點...是關於PCR做不出來的可能性......... 你應該是從某一個tissue抽取他的mRNA...然後轉成cDNA....... 接著設計你所想要釣出的target DNA primer..... 然後去做定序.......... 我之前的發言好像有一點轉移了焦點....
(還有479個字)
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