Re: [問題] 請問PCR Full-length cDNA ?
看板Biotech (生命科學)作者mandible (生化...go go go !!)時間19年前 (2006/12/31 10:55)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串7/9 (看更多)
※ 引述《puec ()》之銘言:
: 如果你的template是 cDNA,那你可能是碰到了一些secondary structure,
: secondary structure可能在你的primer 黏上去以前就形成了,因此佔據了
: 你的primer原本應該結合的位置。
: 解決方法很簡單,primer做長一點,往3'延伸就可以了。我的經驗是... 36個mer
: 的primer做不出來,加到40個mer就ok了。
我的data是在100bp以下一定會有的primer dimer
但是奇怪的就是在100bp上面左右會有primer的tetramer
是不是就是真的如你所說!我會在逝世看
我昨天用了55c還是一樣有這種狀況
跑了這麼久的pcr還是第一次有這種情形.快瘋了
要投稿的最後兩個data~~唉.卡在這做不下去
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