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[問題] 請問PCR Full-length cDNA ?

看板Biotech (生命科學)作者時間19年前 (2006/12/28 18:21), 編輯推噓3(3推 0噓 0→)
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作者: mandible (生化...go go go !!) 看板: Biotech 標題: [問題] 請問PCR Full-length cDNA? 時間: Thu Dec 28 18:24:43 2006 PCR很多次了 還是P不出來 感覺primer dimer很明顯? 請問高手有哪些方法?可以教導我!! 我的條件是 94度C-1mins 45度C-2mins 72度C-3mins 跑36 cycles pcr product大概是784bp(我知道很短)但是就是跑不出來! 用的是taq proofreading enzyme (因為要送去定序) 大概是這樣!x -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.49.5 ※ 編輯: mandible 來自: 203.64.49.5 (12/28 18:25) ※ 編輯: mandible 來自: 203.64.49.5 (12/28 18:25) ※ 編輯: mandible 來自: 203.64.49.5 (12/28 18:25) ※ 編輯: mandible 來自: 203.64.49.5 (12/28 18:26)
推
12/28 18:31, , 1F
試試看提高annealing溫度....extension時間不用這麼長吧?
12/28 18:31, 1F
推
12/28 18:33, , 2F
cDNA品質好嗎？ 5'端確定都有轉錄到嗎？
12/28 18:33, 2F
推
12/28 21:04, , 3F
cDNA確定都有P到~有用其他基因驗證!謝謝
12/28 21:04, 3F
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