Re: [問題] Transfection? Synchronization?

看板Medicine (醫學生物)作者blence ( )時間14年前 (2011/04/18 11:13)推噓1(1推 0噓 0→)

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※ 引述《eriel (橘子數)》之銘言： : 其實我覺得不一定得synchronization : 用一些positive control應該就可以看出來transfection的動作是否會影響cell cycle : 就我所知Synchronization通常是不加入FBS，讓細胞停滯在G0/G1 phase : (也許有其他的方法，請各位版友指正) 方法不少，每個的phase有不同方法 : 但如果transfection的動作就會造成G0/G1 arrest : 那synchronizaion後，反而看不出細胞因為transfecion而有G0/G1 arrest 不是在synchronizaion時看arrest 而是之後的release,才能看出cycle progression是否與transfection有關通常一個protein影響cell cycle，不見得會是arrest 甚至,常常是progression的速度出現變化 : 所以我覺得如果可以用G2/M arrest的positive control藥物，如cisplatin : 比較transfection後的細胞是否也有G2/M arrest或是G0/G1說不定可行？ cisplatin是bi-functional DNA alkylator 在S phase的影響甚至比G2/M多 : ※ 引述《ricemushroom (ricemushroom)》之銘言： : : 我想看細胞transfection 後 : : 是否影響細胞的cell cycle : : 但我想先將細胞Synchronization 後 : : 在看transfect 的基因 : : 是否影響細胞的cell cycle : : 請問版上的大大 : : 我是要先加藥讓細胞Synchronization 再 transfect : : 還是先transfect 再Synchronization?? : : 如果是先transfect : : 那我要transfect後多久時間再加藥去Synchronization?? : : 謝謝我會至少24h看到基因表現後，再去做synchronizaion 另外，俟收細胞時間點的protien量是否順利表現，再做調整 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.40.29