Re: [問題] 再請問一下ligation的問題

看板Biology (生物學)作者 (研究院路的紫薇花)時間20年前 (2006/04/29 23:38), 編輯推噓2(201)
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※ 引述《a64toto (我)》之銘言: : 之前在版上有看過一些相關的問題 : 可是還是有一些疑問想請教一下 : 我是使用Q牌的agarose gel extraction kit : 在使用前與使用後都有跑agarose確認有band出來 : 可是在transform都沒有coloy長出來(接到pET 23a vector) 天阿 我跟你用同一個 vector 耶 而且我也還沒做出來XD 我覺得可能是要提高 ligation 的 efficiency 吧 因為有時候做出來也只是幾顆 如果效率再低一點可能真的就沒有 colony了 : 可是接到T vector的都有長出blue colony : 所以應該不是transform出問題囉 : 那要check ligation有沒有問題的話 : 好像positive control是放已經切好的vector是嗎?這樣一定會長出colony嗎? : 還是我搞錯啦 : 還有如果拿10 ul的ligation mixture(已經16度O/N)直接跑agarose gel : 這樣能看得出來有沒有接起來嗎? : 最後我染agarose gel的dye是SYBR不是EtBR,請問這樣會對ligation有影響嗎? -- 天下最難的事,就是享受最簡單平凡的日子 而最簡單平凡的日子,往往是天下最單純的幸福 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.32.9

04/30 00:12, , 1F
那請問應該如何題高呢?
04/30 00:12, 1F

05/01 16:38, , 2F
可能要調整 insert: vector比例
05/01 16:38, 2F

05/01 16:38, , 3F
還有兩者整體的濃度囉
05/01 16:38, 3F
文章代碼(AID): #14KuXljy (Biology)
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