Re: 請問有關PCR的疑惑?
※ 引述《buterscotch ( )》之銘言：
> ※ 引述《ougiyasu (無聊不要找我聊天>.<)》之銘言：
> > 我這幾天做PCR 將sample稀釋十倍
> > P出來的結果很怪 我的sample沒有bands
> > 但是negative control卻有band
> 我感覺妳的negative control的band可能是primer dimer
> 請問是不是大約50-70bp的band呢？
大約在300bp的位置 所以我覺得應該不是primer dimer...
> 另外你的sample沒有band的理由可能是template的濃度還是太高
我是懷疑會不會濃度太低 因為positive control是學長的RNA
他萃出來的濃度更高 所以經過轉錄和放大應該還是比我的多
不過ㄧ般好像都是濃度過多才過P不出來
濃度被稀釋後通常都會P出來......
所以這一點我一直想不出來有可以解釋的地方
> 請問現在的濃度是多少呢？
> 如果template太多
> 這種情況下primer跟dNTP在最早的round就用光了
> 如果更稀釋之後應該就會出現band
> 另外就是可以把PCR product拿1 ul出來
> 當作template在做一次PCR
> > ㄧ般如果是汙染了 我的sample也應該要有band的阿
> > 這樣的結果不知道有沒有可以解釋的地方???
> 希望有幫到你
> 祝你好運
感謝你喔~~~~~有這樣熱心的版友真好
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魚說：你看不見我的淚水，因為我在水中．．．
水說：我能感覺到你的淚，只因你在我的心中。
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