[問題] MBP binding to amylose bead
各位大家好
最近實驗想要利用MBP-fusion protein 作 pull down assay,
所以利用MBP protein作為negative control,
但是遇到一個問題就是MBP 和 amylose bead 結合的效率很像比MBP-fusion protein差,
所以想影問各位有做過類似實驗的人,
是不是有什麼辦法可以改善MBP protein 和amylose bead 結合的效率。
附帶一提,當初從 E. coli裡純化出MBP 以及MBP-fusion protein時
(利用amylose bead 作成的column)
MBP binding上的效率就比較差,所以purify到的量也少了許多,
請問各位有沒有什麼可以改善的方式,
可以增加MBP和 amylose bead 結合的能力。
MBP construct
MBP construct和amylose bead都是從New england Biolabs買來的。
謝謝
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