Re: [問題] 請問如何證實dsRNA的形成與其濃度的測定
先回答您第一個問題, 問得太簡單了, 所以...比較難回答, 首先您得先說明,
您要的dsRNA是要在哪邊形成? 細胞內? 還是自己合成的??還是...
所以這個問題得麻煩您再寫清楚一點!!!謝謝~
第二個問題: 測dsRNA目前最流行的就是利用Real-Time PCR
利用REAL-TIME PCR的原理去測得原始的dsRNA
當然這部份要做REAL-TIME PCR就必需先做RT PCR
這時PRIMER的設計就很重要了!
第三個問題: NanoDrop是不是可以測???
個人比較不建議! 因為干擾比較多~
ps1. dsRNA=siRNA
ps2. Real-Time PCR的原理, 只是一般PCR原理的延伸, 分成兩種1.SYBR GREEN 一種螢光
DYE(做用方式很像Etbr), 在做PCR時加入, 然後每個CYCLE偵測螢光量, 即可達成定
量的效果. 2. Taqman 利用一小段的probe帶著兩個能階不同的化學物質, 利用
pcr時會把兩個化學物質分開造成只有我們要偵測的化學物質發光, 然後去偵測光量
, 一樣是每個cycle偵測一次, 達到即時定量的目的! 當然兩種方式都必需在
real-time pcr機器上做~一般pcr是做不到的!
※ 引述《smilehang (smilehang)》之銘言：
: ※ [本文轉錄自 Bioindustry 看板]
: 作者: smilehang (smilehang) 看板: Bioindustry
: 標題: [問題] 請問如何證實dsRNA的形成與其濃度的測定
: 時間: Mon Mar 10 13:51:55 2008
: 請問在實驗中如何確定dsRNA有形成?(測其熔點嗎)
: 且如何決定其濃度?(NanoDrop可以測嗎?)
: 謝謝!
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