[問題] zebrafish vibratome section 切的時候一直破掉
【問題】:
切片條件跟PAPER上的都相同 連儀器都一樣 但是切的時候SAMPLE不斷的破損
yolk部分都變成空心的 只剩下最外圈 或是整個都掉下來 有方法改善嗎
【問題起因】:
之前切的時候都是切3-4天 所以已經沒有yolk的問題 都是完整的
但是現在要切34H的時候 切了十多片只切出一片
外觀完整但是yolk空心 甚至整個都掉
前處理是34H的zebrafish用 2% PFAT FIX o/n 然後包埋在
2% agarose 在cold PBS中用vibratome切片
paper的可以切到16H都還非常完整
所以說這是可以切出來的
【個人看法】:
paper中是切250 我們切200 UM
厚度只差一點不知道會不會有影響
而刀片我們用的是一般的鍋鬍刀那種雙面剃刀
刀面不知道是否會影響
之前切的四天200的染IHC就有點滲不進去
有點不敢再更厚 先想辦法處理yolk掉落的問題
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