[問題] K562 tatol protein

看板Biology (生物學)作者 (阿啾)時間16年前 (2009/09/16 23:12), 編輯推噓1(101)
留言2則, 1人參與, 最新討論串1/1
不好意思我想請問一下K562和羊水幹細胞哪個大呢?! 因為我最近在萃取PROTEIN 可是一直都做得不是很好, 到最後一步離心完整個是很清澈, 然後去測OD值的結果也超低的!! 所以我在想我是不是因為細胞太小雖然細胞數足夠(6*10^6) 但因為細胞小所以蛋白質少!! 以下是我的步驟!! 1.用 cold d-PBS wash 兩次4度C 1500rpm 5min 2配lysing buffer + protease inhibitor 3.cell pellet vortex 4.加50ul的 2. 5.劇烈vortex 之後冰上作用十分鐘 6.離心10000 rpm 2min 4度C 7.取上清液到新epp 8.存20度C 麻煩幫我鑑定一下我到底哪裡出問題!! 拜託大家了>"<!! 因為我有時間上的限制!! 謝謝.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.167.138.238

09/16 23:23, , 1F
lysing buffer是什麼?
09/16 23:23, 1F

09/16 23:25, , 2F
離心完後可以把沈澱物拿去顯微鏡底下看並用trypan blue染
09/16 23:25, 2F
文章代碼(AID): #1AiG1Goh (Biology)
文章代碼(AID): #1AiG1Goh (Biology)