[問題] FISH Cy3螢光問題
【問題】：雜合後發出的螢光不同以往
【問題起因】：學長畢業後
【個人看法】：是否是probe出問題
各位先進大家好
我是剛接觸FISH這個技術的學生
我並沒有這方面的相關背景
對於螢光Probe不是很了解
有些問題想請教各位
以下有相關的資訊提供各位做回復
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當我的Probe在剛送來的時候
按照學長的SOP做
在顯微鏡底下是可以看得很清楚
而Probe所攜帶的Cy3螢光也是像其他學者雜出來的"暗紅色"
距離現在該Probe大概有放置1年了
我使用該Probe所雜合出來的細胞體是呈現"橘色"
而且並不是每個菌體都被明顯雜合到
我這裡所指的"明顯"並不是專一性的問題
而是感覺雜了一半，有顏色又好像沒有
而且以往雜合DAPI視野下因該是每個細胞體都有"藍光"
可是近來的實驗結果DAPI視野下會有一些細胞體呈現"亮黃光"
還懇請各位先進提供意見
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如果是關於做法部分
我沒有擅自改變學長的SOP
硬體的部分的話
我有請螢光顯微鏡廠商的工程師來幫我看過儀器
他跟我說基本上儀器是沒有大問題
也看過濾光片
大致上是這樣
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.134.64.73
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