Re: [問題] 請問基因圖譜如何定序

看板Biology (生物學)作者Ianthegood (松鼠。)時間15年前 (2010/06/25 23:40)推噓1(1推 0噓 0→)

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※ 引述《kuogary1 (桂冠)》之銘言： : 標題: [問題] 請問基因圖譜如何定序 : 時間: Fri Jun 25 22:17:06 2010 : : : 【問題】：基因圖譜如何定序 : : : 【問題起因】：書上寫說，先把DNA解開，然後加入dATP, dGTP, dCTP, dTTP與引子 : : 接著再把它們混合後分到四個試管，四個試管分別加入ddATP, ddGTP, ddCTP, ddTTP : : 然後開始反應 : : 反應完成後跑電泳讀譜 : : 【個人看法】：可是DNA不是由互補的兩股組成嗎？ : 這樣直接把DNA解開去跑電泳，得到的結果怎麼有辦法代表DNA序列？ : 應該是要先把兩股分離開來吧？再挑一股來跑吧 : === : 先感恩各位大大的回答了^^ : -- : 飢餓是最好的調味孤獨是最強的催眠瘋狂找一雙唇能夠當我酒杯 : : 早就對這一切厭倦也曾憤怒喝下聖水卻又無助醒在下個漫長黑夜 : : -- : ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) : ◆ From: 112.104.158.145 : → turtle24:"引子"設計成只認其中一股 06/25 22:26 : 喔喔喔~暸解 : 那所以，如果像是一般細胞中DNA的複製 : 那個DNA複製就是有兩組RNA引子從兩頭進行嗎？ : 以及，如果這樣，那PCR中的引子，是不是都需要特別挑過... : 不是所有想放大的DNA都能使用？ : ※ 編輯: kuogary1 來自: 112.104.158.145 (06/25 22:32) in vivo的DNA replication從由特殊序列所構成的origin開始通常在原核內origin只有一個然後是bidirectional (因為是環狀DNA) 真核的話就相當多個不然複製完都中秋節了然後"基因圖譜"的定序方式通常是會先將DNA打碎之後ligate到固定序列的aptemer 或是linker上在看要clone進vector裡面再進行sanger法定序或是直接上第二代定序機 aptamer跟linker的序列就是universal的primer序列這些在一般遺傳學跟分生課本裡講的都很清楚可以自己參考看看還有沒錯幾乎每間實驗室都花不少錢在化學合成的primer上面 -- 人好欠表 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.165.225.252 ※ 編輯: Ianthegood 來自: 118.165.225.252 (06/25 23:40)