[問題] DNA smearing on the gel
【問題】：
想解決ＤＮＡ在agarose gel 上smearing的問題
【問題起因】：
一個月前，我用restriction enzyme切DNA, 在膠上可以有明顯的片段
最近再切的時候就整條smear了, 但是Ladder分得很明顯 所以不是膠的問題
然後我只incubate buffer 跟水一個小時， 有buffer的會smear
只跟水incubate 的DNA 可以有明顯的片段
有試過maxiprep 跟mini prep 的 plasmid
只要跟buffer incubate的就會smear
也把水跟buffer換過了 至少三個不同的buffer
tip 跟tube也換了
連pipette都拆開來泡水清潔overnight了
就是找不出原因
【個人看法】：
應該是有某個地方有汙染到DNase 1, 所以跟buffer一起incubate一小時後
整條lane變得很糊
但是該換的都換了 也找不出原因
有請另外一個人幫我試(用他的buffer跟water) 結果沒有smear的問題
但是把他的buffer跟水拿來給我做反應
又整條 smear
不知道到底問題在哪裡
不好意思中英文混著打
希望有經驗的人能分享一下
謝謝
【參考資料/連結】：
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09/03 11:45, , 1F
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推
09/04 11:56, , 2F
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