[問題] RT-PCR primer 不能用
【問題】
我設計了一對primer想用來偵測mRNA的量
片段位於Exon上,大小約75bps,
收到primer後有用genomic DNA做為template去跑PCR,
跑膠結果是Single band,且大小符合,
於是就用RT PCR後的cDNA做為template去跑PCR,
跑膠結果卻是2條band且都大於100bps,
有跑RNA膠也有跑-RT(有MMLV不加RNA)確認無DNA汙染
不知道為什麼會這樣?
(PCR藥品條件都一樣,elongation時間為10秒)
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